RTPCR的原理
rtpcr原理及应用?？
rtpcr原理及应用如下🌧🌱————🌻：RTPCR的中文名是实时荧光定量聚合酶链式反应🦏__🤓。RT-PCR技术是一种检测病原体核酸的方法🐉🌼--🦙🦆，主要用于检测病毒🦓_-🍂、细菌及其他微生物的核酸😇😍__🍂🌈。RT-PCR以RNA为模板🦨*_-♟，利用聚合酶链式反应扩增其特定片段🪡🌳_🎽🐵，然后通过荧光探针实时检测扩增过程中的产物🐔🐩|🦃，并将结果转化为数字信号🐰——🐷，从而确定样本中该病原体有帮助请点赞🙃-☘️。
RT-PCR中不涉及的是探针🤮🪁——_🐗🐖。RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应🐞——-🦏。原理是🐅|🐐：提取组织或细胞中的总RNA🌦_✨，以其中的mRNA作为模板👽--🙉😱，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA🌧-🏏。
rtpcr原理及应用如下🌧🌱————🌻：RTPCR的中文名是实时荧光定量聚合酶链式反应🦏__🤓。RT-PCR技术是一种检测病原体核酸的方法🐉🌼--🦙🦆，主要用于检测病毒🦓_-🍂、细菌及其他微生物的核酸😇😍__🍂🌈。RT-PCR以RNA为模板🦨*_-♟，利用聚合酶链式反应扩增其特定片段🪡🌳_🎽🐵，然后通过荧光探针实时检测扩增过程中的产物🐔🐩|🦃，并将结果转化为数字信号🐰——🐷，从而确定样本中该病原体有帮助请点赞🙃-☘️。
RT-PCR中不涉及的是探针🤮🪁——_🐗🐖。RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应🐞——-🦏。原理是🐅|🐐：提取组织或细胞中的总RNA🌦_✨，以其中的mRNA作为模板👽--🙉😱，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA🌧-🏏。
RT-PCR一般情况下是指反转录PCR🦐_🦧🐥。基本操作过程是将所提取的RNA进行反转录🐐🤐--🐜♥，然后将所获得的cDNA作为模板🦝_——⛸🐗，设计引物进行扩增🧸|🤬🌍，是一种检测基因表达的常用方法🦘_🎍🃏。实时荧光定量PCR也就是Real-Time PCR🐲_——🦚，Real-timePCR是在PCR扩增过程中🦣-|🌤，通过荧光信号🐁🌲--⛅️，对PCR进程进行实时检测😴-🦚🦕。由于在PCR扩增的指数时期🐱🏵|🐐😈，模板的Ct值说完了🤬🌼|——🎰。
1🦍|——☺️🤤、所说的PCR应该就是最常规的PCR🌻🦚_——😦🦖，以DNA为模板🙈🦬_——🎆，通过上下游引物🥅-|🦙🐁，实现DNA的扩增🤪-🎇🐾。2🐕🐜-_🌾🐡、RT-PCR一般情况下是指反转录PCR（reverse transcription）🌴_🦒🐃，尽管有些资料上说实时荧光定量PCR也（realtime fluores-cence quantitative PCR）也简称RT-PCR🦝|-🦢💫，但是这是不对的🍂🏒-*🎁，不推荐🦆🤐|👺。基本操作过程是将所提取的RNA进行有帮助请点赞🤤🎉——|🌑🐊。
核酸检测阴性是好的还是阳性是好的 核酸检测阴性是好是坏?？
至少包括两步🦣🌪|☘️，先提取出病毒RNA🌎_🕷🌩，如果样本中有病毒🦇_😬🐃，要进行RTPCR即聚合酶链反应🎫-_👽🐙，进行基因扩增😢🐸__🏒，看在样本中是否存在病毒RNA🐖_——🧵，也是目前用的最多的阳性确诊方式🪄——🌾🐕🦺。如果要是阴性😅🐩_🐵，也不能完全排除不是新型冠状病毒肺炎感染🐑|😓，因为不同试剂盒的灵敏性🙂🌍——🌻🐘，可能会出现的污染或质量控制等都可能会出现问题🐗🐱_|🐭，造成检测出现到此结束了？🎎-|🐺。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成🙉🐾|🤡🌱：①模板DNA的变性😽-|😻：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后🦗🦒_*❄，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离⛅️-🌝，使之成为单链🪅——🎗🎁，以便它与引物结合🌑⭐️-_🎰，为下轮反应作准备🦙🦅——🐿；②模板DNA与引物的退火(复性)🐿🤮|——😙：模板DNA经加热变性成单链后🦈——|😹，温度降至55℃左右🏸🌑_🎽🐺，引物与模板DNA单后面会介绍🐌——🍁。
RACE的结果和RTPCR的结果分别会得到些什么??？
RT-PCR🐋-⛳，则是先把RNA 反转录（RT）为cDNA🍁😆-——🎁，然后做PCR😇——🐩。不一定要得到全长🐱-🌷。可以是中间的任意一段😅🐈-🍁🦟。看引物位置而定🤬-|🐸😠。补充回答😲🃏--🎍🌾：另外🌑|🦃🐣，RACE的话一般是从mRNA两边的同源序列设计引物么？如果保守序列不位于两侧？那是不是先[说完了🕷🌨||🐲*。
八成不能🦊😋|🦅。直接PCR获得的真核生物基因基本都含有内含子🧧——_🦄🌎，而原核生物不具备剪切内含子的功能😮_🦡🎟。如果使用RTPCR🦝--🦍🪡，以mRNA为模板反转录出DNA😊-_🌗🦟，则不含有内含子🐊——😃，条件合适的情况下可以在原核生物中表达*🌿||🐞🐃。
Q-PCR溶解曲线怪异图:?？
它被用掉了*_🦁，所以第一个峰掉下来🦓——-🦄。然后第二个峰是产物🥊——🌱🐅。但是它为什么最后也会下来？是记录方法的问题吗？仔细分析一下原理🐸__👻，就能做出推断🪳🐦-_🙀🕸。不要告诉我你的图是从右向左读吧？有一篇中文的文章🍁--😆，可能有所帮助☀️🐐-🐍。 ---晕了🎽-——😄，等我继续说🦎😏——🌨😉。
基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法🐑*-🎋，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用😇🪆——|🦠。1🐔🎎-🥊、基于real-time RT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒(引物和探针序列为美国CDC设计):4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-time RT-PCR引物和探针🙊😙——😂，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的后面会介绍🐯_⛳。